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化学发光免疫测定(CLIA)技术
更新时间:2015-06-08 点击次数:1365次
化学发光免疫测定(Chemiluminesent Immunoassay,CLIA)是免疫测定技术继酶免技术(EIA)、放免技术(RIA)、荧光免疫技术(FIA)和时间分辨荧光免疫技术(TRFIA)之后发展的一项新兴测定技术。要谈化学发光免疫测定技术就必须先谈化学发光。
化学发光技术是近二、三十年来发展起来的一种测定方式,其利用化学反应释放的自由能激发中间体(常用碱性磷酸酶-金刚烷胺),使其从激发态回到基态,当中间体从激发态回到基态时会释放等能级的光子,对光子进行测定而进行定量分析。化学发光具有荧光的特异性,同时不需要激发光,就避免了荧光分析中激发光杂散光的影响有很高的灵敏度,并且不象放射分析那样存在强烈的环境污染和健康危害,是一种非常的定量分析方法。
虽然化学发光具备很高的特异性和很小的干扰,但化学分析本身的不特异性,制约了整个方法的使用。因此,如同RIA、FIA等一样利用免疫反应的特异性和化学发光本身的信号特异性形成了目前所说的化学发光免疫测定(CLIA)技术。
CLIA是一种高度敏感的微量测定技术,凡具有抗原性的物质(包括半抗原)都可以用CLIA测定。其起步于80年代初,快速发展于90年代,在国外CLIA的应用处于蓬勃发展的阶段,其具备以下特点
①高度敏感,极限达10-17-10-19M/L,远高于RIA、EIA,与TRFIA相当但比TRFIA便宜。
②特异性强,重复性好C.V.<5%。
③测定范围宽,可达7个数量级。
④试剂稳定性好,有效期6-12月。
⑤操作简单,易于自动化。
在对环保很重视的国家,CLIA成了取代RIA的方法。